Full Name of the work head: Боровиков Сергей Николаевич
Исполнители проекта:
: Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии"
Inventory number: 0322РК00428
Registration number: 0122РК00274
Keywords: CTA-4,PD-L1,иммунитет,моноклональные антитела,рекомбинантный антиген,хронические инфекции
В результате дизайна, на основе экспрессионного вектора pET28 были спроектированы две генетические конструкции содержащие гены внеклеточных доменов рецепторов PD-1 и CTLA-4 крупного рогатого скота. Гены внеклеточных доменов рецепторов PD-1 и CTLA-4 крупного рогатого скота синтезирован в условиях de novo длинной 600 и 400 пароснований, соответственно. Секвенирование синтезированного гена показало 100% совпадение с прогназируемой нуклеотидной последовательностью. Синтезированные гены клонирован в экспрессионную плазмиду pET28 и наработаны в концентрации 208 - 328 нг/мкл, объемом 200 мкл. В результате трансформации клеток кишечной палочки штамма BL21 генетическими конструкциями pET28/PD-1 и pET28/CTLA-4 получены штаммы продуценты E.coli BI21/pET28/PD-1 и E.coli BL21/pET28/CTLA-4. Штаммы клеток стабильно продуцировали рекомбинантные белки молекулярная масс белков составила 21 и 34 кДа соответствующие прогнозируемой массе искомых белков. Получены очищенные препараты рекомбинантных CTLA-4 и PD-L1 белков крупного рогатого скота.
Новизна результатов: в первые в республике получены штамм-продуцентов рекомбинантных внеклеточных доменов CTLA-4 и PD-L1 рецепторов клеток иммунной системы крупного рогатого скота.
