Full Name of the work head: Хамзина Салтанат Рашидовна
Исполнители проекта:
: Товарищество с ограниченной ответственностью "Национальный центр биотехнологии"
Inventory number: 0322РК00723
Registration number: 0121РК00164
Keywords: генетически модифицированные растения,культура клеток,люцерна посевная,фиторемедиация,экспрессия
Agrobacterium-опосредованная трансформация гетерогенных каллусов люцерны посевной оптимизирована с помощью репортерного гена, кодируемого бинарным вектором pSRB-CYP450. С помощью мониторинга транзиентной экспрессии репортерного гена выявлена низкая компетентность клеток изучаемого сорта люцерны к агробактериальной трансформации, тем не менее, выявлено, что ацетосирингон в концентрации 100 мкМ, суспензия бактерий при О.П.=0,3 и 48 часовая ко-культивация с бактерией является оптимальными для Agrobacterium–опосредованной трансформации каллусов люцерны. Селекция трансформированных клеток и изучение особенностей регенерации растений из трансформированных клеток люцерны посевной проводятся в культуре in vitro. В качестве селективного агента используется фосфинотрицин (РРТ), устойчивость к которому обеспечивается геном bar, который входит в состав конструкции pSRB-CYP450. Проведена оптимизация среды В5 по гормональному составу. Всего трансформированы 126 чашек Петри (более 3000 шт) каллусов, из них 235 подверглись некрозу на селективной среде с РРТ. Морфогенные трансформированные каллусы пассированы на 4 варианта питательной среды (В5-1, В5-2, В5-3, В5-4) для регенерации растений. В ходе проведённых экспериментов определена, что вариант В5-2 является наиболее оптимальной питательной средой для регенерации трансформированных каллусов люцерны. Эксперименты продолжаются.