Разработка биотехнологии повышения продуктивности растений посредством активации процесса биогенеза рибосом
Full Name of the work head: Жигайлов Андрей Викторович
Исполнители проекта:
: Республиканское государственное предприятие на праве хозяйственного ведения "Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А. Айтхожина"
Inventory number: 0222РК00196
Registration number: 0120РК00370
Keywords: 40S рибосомные субчастицы,5’TOP-содержащие мРНК,Киназа рибосомного белка S6 растений,Трансляция,Фосфомиметическая мутация
Результаты работы и их новизна: мутированный in vitro кДНК-ген AtRPS6K2(S296E,S437E,T455E), кодирующий конститутивно активированную форму киназы RPS6 из A. thaliana (AtRPS6K2), был клонирован в бинарный вектор pCAMBIA2300 под контроль «сильных» промотора и терминатора транскрипции и энхансера трансляции. Проведена временная и стабильная трансформация табака с использованием линии агробактерий, несущей плазмиду pCambia-35S-5’TEV-His-AtRPS6K2(S296E, S437E, T455E)-Nos. Методами ПЦР, ОТ-ПЦР и иммуноблоттинга подтверждено встраивание в геном регенерантов трансгенной кассеты и экспрессия мутированного кДНК-гена в их клетках. Анализ показателей продуктивности опытных и контрольных растений выявил достоверную разницу в отношении высоты побегов, сырой биомассы, числа листьев, общей площади листовой поверхности, скорости прорастания семян.
