Разработка технологической платформы по получению рекомбинантного ферментного препарата в культуре дрожжей
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Хасенов Б.Б., Силаев Д.В., Абельденов С.К. и др.
: Национальный центр биотехнологии Республики Казахстан
Inventory number: 0215РК02172
Registration number: 0114РК00332
Keywords: фитаза*ферментные препараты*дрожжи*рекомбинантный белок
Оптимизирован состав питательной среды по источникам углерода и азота для инкубирования генно-инженерного штамма дрожжей - продуцента рекомбинантной фитазы АррА. Установлено, что оптимальным источником углерода является глицерин в концентрации 2-4 %. Выявлено, что использование 2 % метанола в качестве индуктора является оптимальным для секреции рекомбинантной фитазы в среду. Выявлено, что наиболее оптимальной температурой наработки клеточной массы и индукции белка является диапазон от +28әС до +30әС, а наиболее эффективным значением pH соответствует диапазон значений от 3 до 6. Установлено, что рекомбинантная фитаза АррА активна при кислом значении рН и имеет максимум при 5,0. Рекомбинантная фитаза АррА имеет максимальную активность при +40әС - +50әС. Полученная рекомбинантная фитаза в лабораторных условиях обладает высокой удельной активностью, активна при кислом значении pH и высокой температуре, что должно обеспечить высокое качество конечного продукта при внедрении его в сельское хозяйство. Получен новый штамм дрожжей P.pastoris X-33 pPICZальфаA/AppA, эффективно экспрессирующий рекомбинантную фитазу AppA.