Создание технологии производства рекомбинантного гранулоцитарного колониестимулирующего фактора в культурах клеток млекопитающих
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Шустов А.В., Шагырова Ж.С.
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0215РК02186
Registration number: 0114РК00336
Keywords: вирусный вектор*гранулоцитарный колониестимулирующий фактор*культура клеток млекопитающих
Получен вирусный вектор VEE(L)/Cm-GFP с нецитопатогенной репликацией в культуре CHO. Ген G-CSF с сигнальным пептидом для секреторной экспрессии клонирован в вирусный вектор в составе генной кассеты GFP-2A-G-CSF. Продемонстрирована цитоплазматическая продукция G-CSF в свободном виде, что подтверждает правильный процессинг полипротеина GFP-2A-G-CSF. Получена секреторная продукция рекомбинантного G-CSF в культуре клеток. Рекомбинантный человеческий G-CSF очищен из среды инкубации до электрофоретической чистоты (>90 %) с помощью металлоаффинной хроматографии.