Создание биотехнологического производства антител к специфичным маркерам плюрипотентных стволовых клеток
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Огай В.Б., Хасенов Б.Б., Секенова А.Е., Ли Е.А., Ли П.К.
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0215РК02175
Registration number: 0114РК00358
Keywords: плюрипотентные стволовые клетки*поликлональные антитела
Созданы генетические конструкции в виде векторов pOct4 и pNanog, в которых целевой ген oct4 и nanog встроены под контроль промотора бактериофага Т7. Получены рекомбинантные штаммы-продуценты Rosetta(DE3)/pOct4 и Rosetta(DE3)/pNanog с подтвержденной высокой и стабильной экспрессией рекомбинантных транскрипционных факторов Oct4 и Nanog. Оптимизированы условия по выделению и очистке рекомбинантных Oct4 и Nanog из водонерастворимых фракций. Отработана схема получения кроличьих поликлональных антител IgG к рекомбинатным Oct4 и Nanog. Результаты ИФА и иммуноблота показали, что полученные поликлональные антитела обладают высокой специфичностью к Oct4 и Nanog. Также показано, что полученные поликлональные антитела способны связываться c нативными транскрипционными факторами Oct4 и Nanog в плюрипотентных стволовых клетках человека.
