Разработка технологии производства иммунохроматографической тест-системы для диагностики бруцеллеза на основе рекомбинантных антигенов
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Ескендирова С.З., Сарина Н.И., Манат Е.
: Национальный центр биотехнологии Республики Казахстан
Inventory number: 0214РК02461
Registration number: 0114РК00341
Keywords: рекомбинантный антиген*бруцеллез*плазмида*ген
Проведено моделирование гена и дизайн in silico генетических конструкций для синтеза рекомбинантного антигена бруцелл - OMP28. Подобраны первичные структуры олигонуклеотидов для синтеза целевого гена OMP28 с последовательностями, кодон-оптимизированными для экспрессии в E. coli. Проведен синтез de novo в синтетической ПЦР гена OMP28, который затем клонирован в составе высококопийных неэкспрессионных бактериальных плазмид и в составе экспрессирующей конструкции на основе вектора для бактериальной экспрессии pET22. Проведен эксперимент по оценке накопления рекомбинантного антигена OMP28 бруцелл в культурах экспрессирующего штамма BL21(DE3), трансформированного полученной конструкцией pET22/OMP28. Определены оптимальные параметры культивирования штаммов-продуцентов для экспрессии рекомбинантного белка и оптимизация условий и экспрессии рекомбинантного белка. Предложена технология производства иммунохроматографической тест-системы для диагностики бруцеллеза на основе рекомбинантного антигена.
