Разработка технологии получения рекомбинантной альфа-амилазы для пищевой и перерабатывающей промышленности
Руководитель проекта: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Хасенов Б.Б., Ахметоллаев И.А., Кириллов С.О.
Организация: Национальный центр биотехнологии Республики Казахстан
Инвентарный номер: 0214РК01146
Регистрационный номер: 0114РК00334
Ключевые слова: Амилаза*Дрожжи*Крахмал*Рекомбинантный белок*микроорганизмы-продуценты
Получены генетические конструкции pET-22b/amy1UA7, pАmyL и pPICZальфаA/amyL, несущих ген альфа-амилазы. Путем трансформации клеток дрожжей получены генно-инженерные штаммы Escherichia coli BL21(DE3)/pAmyL и Pichia pastoris X-33/AmyL. Продукция рекомбинантной альфа-амилазы подтверждена с помощью белкового электрофореза в полиакриламидном геле и вестерн-блоттинга. В результате проведенной работы созданы штаммы микроорганизмов, продуцирующих рекомбинантную альфа-амилазу, имеющую перспективу применения в пищевой и перерабатывающей промышленности в качестве крахмал гидролизующего фермента. Генно-инженерные штаммы продуценты Escherichia coli BL21(DE3)/pАmyL и Pichia pastoris X-33/AmyL были протестированы на отсутствие патогенности в ТОО \"Нутритест\" и были депонированы в коллекции микроорганизмов ТОО \"Казахский научно-исследовательский институт пищевой и перерабатывающей промышленности\" за номером В-720 и В-721, соответственно.