Создание биотехнологического производства антител к специфичным маркерам плюрипотентных стволовых клеток
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Огай В.Б., Хасенов Б.Б., Секенова А.Е. и др.
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0214РК02465
Registration number: 0114РК00358
Keywords: плюрипотентные стволовые клетки*транскипционный фактор*SOX2*антитела*вектор
Исследованы поликлональные антитела специфичные к транскрипционному фактору Sox2 человека. Создана генетическая конструкция в виде вектора pSox2, в которой целевой ген sox2 встроен под контроль промотора бактериофага Т7. Получен рекомбинантный штамм-продуцент Rosetta(DE3)/pSox2 с подтвержденной высокой и стабильной экспрессией рекомбинантного транскрипционного фактора Sox2 человека. Оптимизированы условия по выделению и очистке рекомбинантного Sox2 из водорастворимой и неводорастворимой фракций. Отработана схема иммунизации животных для получения кроличьих поликлональных антител к рекомбинатному Sox2. Показано, что поликлональные антитела способны связываться не только с рекомбинантным, но и нативным транскрипционным фактором Sox2 в плюрипотентных стволовых клетках человека. Эффективность разработки определяется применением поликлональных антител для детекции транскрипционного фактора Sox2 в плюрипотентных стволовых клетках.
