Разработка новой технологии генетической идентификации сортов пшеницы с хозяйственно ценными признаками
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Календар Р.Н., Хапилина О.Н., Новаковская А.П.
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0214РК02463
Registration number: 0114РК00355
Keywords: пшеница*секвенирование*ген*генотипирование*генная инженерия растений
Получены данные по нуклеотидным последовательностям аллельных вариантов наиболее важных для культуры пшеницы генов - изоферментов, запасных белков, генов устойчивости к болезням и гомеостаза. Проведен поиск линий пшеницы для формирования коллекции по базам из мировых коллекций. Cформирована коллекция из стародавних сортов мировой селекции, зарубежных стародавних сортов, являющихся доминантными предками большинства современных сортов. Разработана схема получения фракции, генно-кодирующей ДНК, содержащая последовательности генов, включая интрон-экзонные и промоторные участки: рестрикция геномной ДНК с помощью рестриктаз, нечувствительной к сайтам метилирования GC; лигирование PstI адаптора к фрагментированной ДНК; выделение мРНК, содержащей последовательности экзонов; синтез двухцепочечной кДНК с праймерами мечеными Биотином; гибридизация фракции геномной ДНК с двухцепочечной кДНК; амплификация геномной фракции ДНК, обогащенной последовательностями генов (экзонов).