Получение щелочной фосфатазы и пероксидазы хрена для использования в диагностике инфекционных заболеваний
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Силаев Д.В., Кирибаева А.К., Кириллов С.О.
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0217РК01453
Registration number: 0116РК00414
Keywords: щелочная фосфатаза*рекомбинантны белки*ферменты*фосфатаза
Ген щелонной форфатазы phoB амплифицирован с геномной ДНК бактерии Bacillus licheniformis и клонирован в составе бактериального экспрессионного вектора pET-28c (+). Данной генно-инженерной конструкцией pET-28c/pPhoB трансформированы компетентные клетки штамма ArcticExpress(DE3)RP. Получен генно-инженерный штамм-продуцент E.coli/pPhoB рекомбинантной щелочной фосфатазы phoB. Активность полученной рекомбинантной щелочной фосфатазы составила 167 Ед/мг белка. Определено влияние ионов металлов на активность фермента рекомбинантной щелочной фосфатазы. Разработан лабораторный регламент производства рекомбинантной фосфатазы. Создан дрожжевой штамм-продуцент рекомбинантной пероксидазы хрена. Активность фермента составила 230 Ед/мг.
