Разработка технологической платформы молекулярной диагностики на основе метода петлевой изотермической амплификации (LAMP) и получение рекомбинантных Bst, Tth и Klenow Fragment ДНК полимераз
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Хасенов Б.Б., Календарь Р.Н., Абельденов С.К., Ли П.К., Мусахметов А.С.
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0217РК01501
Registration number: 0115РК01801
Keywords: полимераза*рекомбинантные белки
Получены штаммы E.coli BL21(DE3)/pBstFL, BL21(DE3)/pBstLF, BL21(DE3)/pTth и BL21(DE3)/pKlf. Выделены и очищены рекомбинантные ДНК полимеразы BstFL, BstLF, Tth и Klenow Fragment, подтверждена их полимеразная активность. Оптимизированы условия амплификации по методу LAMP. Получены генно-инженерные экспрессионные конструкции pKlenTaq и pTaqSSB, несущие ген Taq ДНК полимеразы из T.aquaticus (удалена 5\'-3\' экзонуклеазная активность) и ген Taq ДНК полимеразы из T.aquaticus (слит с ДНК связывающим доменом из S.solfataricus). Разработаны лабораторные регламенты производства ДНК полимераз.
