Разработка биотехнологии создания трансгенных растений хлопчатника с устойчивостью к гербицидам сплошного действия
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Манабаева Ш.А., Рахимжанова А.О., Абеуова Л.С., Жумабек А.Т.
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0215РК01741
Registration number: 0115РК01999
Keywords: Бинарный вектор*Хлопчатник*Гербицидоустойчивость
Проведен дизайн генно-инженерных конструкций, экспрессирующих ген фосфинотрицин-ацетилтрансферазы и репортерные гены, кодирующие beta-D-глюкуронидазу и зеленый флуоресцентный белок (GFP) под растительными промоторами на базе существующих бинарных векторов pLH7, рCambia и р31. В качестве матрицы, используя бинарный вектор рCambia была амплифицирована экспрессионная кассета, включающая в себя убиквитиновый промотор кукурузы, репортерный ген GUS и терминатор T-nos, и в последующем была клонирована (лигирована) в бинарный вектор pLH7. Получена ДНК плазмиды pBG7 содержащая ген фосфинотрицин-ацетилтрансферазы и репортерный ген b-D-глюкуронидазы. Для создания бинарного вектора, содержащего гены РАТ и GFP за основу был взят вектор pBG7. Последовательность гена GFP (744 п.н.) была амплифицирована на матрице бинарного вектора р31. Продукт полимеразной цепной реакции был разрезан с помощью рестриктаз SacI и SpeI, в последующем был клонирован (лигирован) в SacI и SpeI обработанный бинарный вектор pBG7, между промотором Ubi1 и терминатором гена T35S. В результате проделанной работы получены бинарные вектора pBG7 и и pBPAT-GFP, содержащие ген фосфинотрицин-ацетилтрансферазы и репортерные гены GUS и GFP, которые будут применяться для разработки биотехнологии создания трансгенных растений хлопчатника с устойчивостью к гербицидам сплошного действия.