Молекулярно-биологические характеристики адгезина молочнокислых бактерий, усиливающего пробиотическую активность биопрепарата
Руководитель проекта: Абжалелов А.Б.
Исполнители проекта: Шегебаева А.А.
Организация: Республиканская коллекция микроорганизмов
Инвентарный номер: 0215РК01916
Регистрационный номер: 0115РК00350
Ключевые слова: молочнокислые бактерии*пробиотики*генотипирование*секвенирование*белки адгезии*автоагрегация*протеолиз*ионообменная хроматография*электрофорез
Исследованы белки адгезии, выделенные из молочнокислых продуктов промышленного и домашнего производства. Выделены и генотипированы местные МКБ из традиционных продуктов питания. Проведен скрининг штаммов МКБ на автоагрегационную активность и проведена группировка штаммов с фенотипами 3-х уровней. Доказана белковая природа автоагрегации с применением протеолитических ферментов (протеиназа К и пепсин). Исследован ингибирующий эффект LiCl и NaCl на % автоагрегации. Предложен механизм ингибирования автоагрегационной активности на основе результатов по определению константы ингибирования NaCl и оптимума рН для автоагрегации МКБ. Проведено ступенчатое выделение солевых фракций адгезина. Исследован эффект восстановления солевыми фракциями адгезина автоагрегационных свойств продуцента адгезина, прошедшего обработку протеолитическими ферментами. Проведена подготовка к выполнению методов по определению связывающей муцин активности белков: Вестерн-блоттинг анализ полипептидов, полученных методом ПАА гель-электрофореза. Очищен коммерческий препарат муцина и проведена ковалентная пришивка к нему пероксидазы хрена.