Биохимическая характеризация ферментов репарации повреждений ДНК у возбудителя туберкулеза Mycobacterium tuberculosis
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Абельденов С.К., Хасенов Б.Б., Акишев Ж.Д., Тургимбаева А.Н., Кирибаева А.К.
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0215РК02340
Registration number: 0115РК01800
Keywords: эндонуклеазы*репарация*туберкулез*ДНК
Получены генетические конструкции рЕТ-28c (+)/XthA и pET-28c (+)/Nfo с клонированными под контроль промотора РНК полимеразы бактериофага Т7 генами nfo/end и xtha на основе экспреcсинного вектора pET-28c (+). Секвенирование полученных рекомбинантных векторов подтвердило отсутствие мутаций в открытой рамке считывания в виде делеций, инсерций и замен. Проведена очистка рекомбинантных ферментов репарации повреждений ДНК Nfo и XthA с помощью методов хроматографии. В результате хроматографичекой очистки было наработано 5 мг рекомбинантного белка Nfo и 5 мг рекомбинантного белка XthA. Очищенные XthA и Nfo белки обладают более 99 % чистоты. Хранение очищенных образцов XthA и Nfo осуществляется при -20 {o}С в 50 % глицерине.