Разработка методов детекции генетически модифицированных культур с использованием LAMP метода и косвенных методов для неизвестных генно-инженерных конструкций
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Раманкулов Е.М., Календар Р.Н.
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0215РК01746
Registration number: 0115РК01998
Keywords: генетически модифицированные растения*метод LAMP*детекция*полимеразная цепная реакция*клеточная биология*молекулярная биология
Рассмотрена разработка косвенных методов детекции генетически модифицированных растений на принципе опосредованного плейотропного действия и множественных рекомбинаций в хромосомах. Были проанализированы векторные системы на особенности используемых основных генетических конструкций, генов и промоторов. Сформирована коллекция генно-модифицированных линий Arabidopsis thaliana из мирового источника The Arabidopsis Information Resource и The European Arabidopsis Stock Center. Кроме того, были получены листья ГМО растений табака (Nicotiana benthamiana) трансформированные вектором (TBSV), содержащий стандартный промотор CaMV35S и терминатор WOS, и ген устойчивости к антибиотику канамицину. Был проведен подбор ПЦР и LAMP (петлевая-опосредованная изотермическая амплификация) праймеров на гены устойчивости к антибиотикам, таких как гидромицин, неомицин, и к промоторам CaMV 35S промотору и Т-nos3\'. Результаты ДНК амплификации с ДНК трансгенных линий показали наличие в линиях ген устойчивости неомицин, наличие последовательностей CaMV 35S промотора и для T-nos.