Генетикалық инженерия және клеткалық технологияның инновациялық тәсілдерін қолдана отырып бидай мен картоптың жаңа линияларын алу
Full Name of the work head: Малахова Наталья Петровна, Скиба Ю.А.
Исполнители проекта:
: Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А.Айтхожина
Inventory number: 0218РК00806
Registration number: 0118РК01183
Keywords:
"Объект исследования разработки или проектирования. Трансформированные линии пшеницы, трансформированные линии картофеля, ДНК.
Цель работы. Получение новых линий пшеницы и картофеля и оценка эффективности комплексного применения методов цисгенной трансформации, клеточных и аэропонных технологий.
Методы исследования. Выделение растительной ДНК, полимеразная цепная реакция, синтез праймеров, спектрофотометрия, электрофорез в агарозном и полиакриламидном геле, метод культуры клеток растений in vitro, технология микроклонального размножения растений.
Полученные результаты и новизна. В поле культивировано 500 растений 8 линий трансформированной пшеницы. Получено 456 растений, из которых выделена ДНК и проведен ПЦР анализ на вставку. Урожай семян 456 растений помещен на хранение для дальнейшей оценки стабильности вставки в поколениях. Пробоподготовку ДНК проводили методом В. Климюка. В поколении пшеницы Т1 выявлены 2 линии Ст-29 №35, №33 с нестабильной вставкой, 2 линии Ст-29№ 43, Кз-19 №2 с невысокой стабильностью вставки и 4 линии Ст-29 №25, №44, №26 и Кз-19 №1 с высокой стабильностью наследования гена хитиназы. Из 37 регенерантов цисгенных линий картофеля сортов Аксор и Невский микроклонально размноженных in vitro произведено свыше 1000 клонов. В условиях грунта получено 143 растений картофеля, из них 76 сорта Аксор и 67 сорта Невский. Проведен сбор миниклубней. Анализ 37 трансформированных линий картофеля двух сортов показал присутствие вставки гена хитиназы в двух линиях и 2 линии со вставкой одновременно двух генов - хитиназы и глюканазы.
Основные конструктивные и технико-экономические показатели. Семена 456 цисгенных растений пшеницы. Миниклубни 143 растений 37 цисгенных линий картофеля. Коллекция ДНК цисгенных линий пшеницы и картофеля. Свыше 1000 пробирочных растений трансформированных линий картофеля. Линии пшеницы поколения Т1: Ст-29 №35 и №33 с нестабильной вставкой, Ст-29№ 43 и Кз-19 №2 с невысокой стабильностью вставки, Ст-29 №25, №44, №26 и Кз-19 №1 с высоко стабильной вставкой гена хитиназы. 2 линии картофеля с геном хитиназы и 2 линии с генами хитиназы и глюканазы.
Область применения. Биотехнология. Сельское хозяйство."
