Полученные результаты: Проведено клонирование последовательностей гена бета-1,4-эндоглюканазы Е1 в плазмидах E.coli. В результате получена ДНК плазмиды pUC58/Е1, несущая вставку целевого гена бета-1,4-эндоглюканазы El. Структура гена бета-1,4-эндоглюканазы Е1 подтверждена секвенированием. Целевой ген бета-1,4-эндоглюканазы El выполнен с кодом оптимизированным сигнальным пептидом Ramy3D альфа-амилазы Oryza sativa, который способен направлять секрецию эндоглюканазы в апопласт. Для облегчения очистки из растительного материала фермент модифицирован посредством присоединения к нему короткой гексагистидиновой метки (6 x His). Наличие в геноме ВККТ гена белка р19, ингибирующего посттранскрипционного умолкания генов и повышающего уровень экспрессии целевых белков in planta, является существенным преимуществом данной векторной системы. Правильность собранной конструкции подтверждена рестрикционным анализом. Инфильтрация растений N. benthamiana проведена с помощью суспензии Agrobacterium tumefaciens, несущей рекомбинантную конструкцию Ti-ВККТ-Е1 в условиях in planta. Белковая фракция растительных экстрактов изучена методом Лоури и экспрессия белка бета-1,4-эндоглюканазы Е1 в клетках растений подтверждена с помощью Вестерн блоттинг анализа. Новизна данного проекта заключается, в том, что геном вируса кустистой карликовости томатов (ВККТ) впервые изучается в качестве автономно реплицирующегося вектора для создания генно-инженерной конструкции, обеспечивающего транзиентную экспрессию гена, кодирующего бета-1,4-эндоглюканазы Е1 в растениях.*