Выделение и молекулярно-генетический анализ генов, кодирующих ферментный комплекс, состоящий из малатдегидрогеназы и глютамат оксалоацетат аминотрансферазы пшеницы
Full Name of the work head: Айтхожина Н.А.
Исполнители проекта: Айтхожина Н.А.*
: Институт молекулярной биологии и биохимии им. М.А.Айтхожина
Inventory number: 0214РК02552
Registration number: 0112РК00465
Keywords: гены*клонирование*ферментный комплекс*антигены*антитела*иммуноглобулины G*нуклеотидные замены*рекомбинантный белок*
Исследован ферментный комплекс, выделенный из семян мягкой пшеницы (Triticum aestivum L.) сорта - "Стекловидная-24", состоящий из малатдегидрогеназы (МДГ) и глютамата оксалоацетат аминотрансферазы (ГОАТ). Изучены антитела к ФК, полученные из плазмы крови половозрелых самок морских свинок (Cavia porcellus) и из плазмы крови половозрелых 6-месячных самцов кроликов (Oryctolagus cuniculus L.), гены малатдегидрогеназы и глютамата оксалоацетат аминотрансферазы, РНК, база данных GeneBank, мягкая пшеница. Получен высокоочищенный препарат ФК, который использовали для иммунизации исследуемых животных. Из их плазмы крови были выделены и очищены иммуноглобулины G к ФК. Проведен анализ продуктов экспрессии ферментного комплекса. Выделены, клонированы и определены нуклеотидные последовательности кДНК генов МДГ и ГОАТ. Оптимизированы условия получения рекомбинантных белков МДГ и ГОАТ в бактериальных клетках E.coli штамм BL21(DE3) pLysS.*