Создание детоксикационной блок-системы на основе модифицированных карбонизованных сорбентов с наноструктурированной поверхностью для элиминации бактериального эндотоксина (ЛПС) из биологических жидкостей
Full Name of the work head: Бисенбаев А.К.
Исполнители проекта: Жубанова А.А.*
: Научно-исследовательский институт проблем биологии и биотехнологии при КазНУ им. аль-Фараби
Inventory number: 0214РК01550
Registration number: 0113РК00270
Keywords: Липополисахарид*карбонизованный сорбент*элиминация*пирогенность*токсичность*куриные эмбрионы*клеточные культуры*
Раcсмотрены получение бесклеточных суспензий грамотрицательных бактерий, содержащих липополисахариоз (ЛПС) и изучение их пирогенных и токсических эффектов в нативной форме и после обработки КРШ в экспериментах in vivo и in vitro. Проведен специальный ряд модельных экспериментов, направленных на изучение параметров адсорбции ЛПС из сильно разбавленных растворов, а также в присутствии очень малых количеств адсорбентов. Данный подход позволил получать изотермы адсорбции ЛПС. Получен эндотоксин из клеток Е. соli и S. typhimurium с использованием метода экстракции смесью фенол-хлороформ-петролейный эфир и готового набора "LPS extraction kit" из ChemBio. Выявлено влияние ЛПС на жизнеспособность и миграцию клеток культуры IEC-6. Показано, что эндотоксин блокирует движение клеток, тогда как при добавлении КРШ миграция клеток продолжается, что свидетельствует об активной элиминации ЛПС с клеточной поверхности в присутствии КРШ. Установлено, что особенности и степень влияния коммерческих препаратов ЛПС и препаратов ЛПС, полученных из бесклеточной суспензии грамотрицательных бактерий, а также нивелирующего действия наноструктурированного сорбента КРШ в отношении ЛПС на показатели выживаемости, пирогенности, роста и развития при однократном введении куриным эмбрионам различны в зависимости от периода онтогенеза. Полученные результаты свидетельствуют о том, что введение суспензии ЛПС куриным эмбрионам приводит к гипертермии (в среднем 2,7С), гибели (в среднем 19%) и к уменьшению массы/длины тела по сравнению с куриными эмбрионами, обработанными КРШ, и контрольными группами. Результаты, полученные при изучении динамики изменения морфометрических и пирогенных показателей развития куриного зародыша in vivo под влиянием суспензий ЛПС различного происхождения могут быть использованы в научных целях и при составлении учебных материалов по биотехнологии и биологии.*