Разработка экспресс-теста для диагностики вирусных заболеваний картофеля
Руководитель проекта: Куришбаев А.К.
Исполнители проекта: Хасанов В.Т.*
Организация: Казахский агротехнический университет им. С.С.Сейфуллина
Инвентарный номер: 0214РК02450
Регистрационный номер: 0112РК01356
Ключевые слова: вирусы картофеля*антигены*антитела*иммунохроматографический тест*иммуноферментный анализ*
Получены сыворотки крови лабораторных животных к исходному антигену вирусов картофеля PVY с содержанием высоких титров специфических антител. Отработаны оптимальные параметры получения препаратов конъюгатов специфических антител с коллоидным золотом. В результате тестирования конъюгатов антител с коллоидным золотом установлена их высокая активность по отношению к специфическому антигену. Отработаны основные этапы и параметры изготовления ИХА-тестов и использования специфических реагентов, оптимальный объем внесения конъюгата, обеспечивающий равномерную пропитку мембраны и отсутствие избытка реагента. Оптимальная концентрация внесения поликлональных антител в тестовой зоне - 250 мкг/мл, оптимальная концентрация антивидовых препаратов Anti-mouse IgG, используемых для формирования контрольной зоны, 60 мкг/мл. Установлена строгая специфичность и высокая чувствительность (0,04 мкг/мл) разработанного ИХА-теста к PVY. Проведены лабораторные испытания разработанных тестов в сравнении с зарубежными аналогами. Разработан лабораторный регламент изготовления и применения компонентов "Экспресс-теста для диагностики вирусных заболеваний картофеля". На основе метода иммунохроматографии создана простая и эффективная отечественная тест-система для экспресс-диагностики вирусной инфекции картофеля. *