Изучение механизмов экспрессии гена зеленого флуоресцентного белка и организация GFP-платформы для разработки технологии получения гетерологичных белков в различных экспрессионных системах
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Хасенов Б.Б.*
: Национальный центр биотехнологии Республики Казахстан
Inventory number: 0214РК01148
Registration number: 0112РК00354
Keywords: зеленый флуоресцентный белок*эукариот*экспрессия гена*
Получена генно-инженерная конструкция pBUDCE4.1/gfp/mcherry. Вектором pBUDCE4.1/gfp/mcherry были трансфецированы клетки человеческих клеточных линий Hela, MRC5 и HEK293. На основе вектора pVEE/gfp получены РНК репликоны. При трансфекции клеток Hela, MRC5 и HEK293 установлено, что РНК репликон VEE, автономно реплицируется в клетках млекопитающих. Определено, что наиболее подходящей человеческой клеточной линией является HEK293. Проведен анализ по эффективности экспрессионных систем на основе бактерий, дрожжей и клеток млекопитающих. Сравнением установлено, что при экспрессии в бактериях наибольшую эффективность демонстрирует система, основанная на использовании промотора бактериофага Т7. Наибольшую эффективность показала система, основанная на метилотрофных дрожжах Pichia pastoris.*
