Разработка технологии получения рекомбинантных ферментов - гидролаз для сельского хозяйства
Full Name of the work head: Раманкулов Е.М.
Исполнители проекта: Хасенов Б.Б.*
: Национальный центр биотехнологии
Inventory number: 0214РК01147
Registration number: 0112РК00988
Keywords: гидролаза*ферменты*рекомбинантный белок*
Создана генетическая экспрессионная конструкция рАррА, содержащая ген фосфогидролазы аррА. Получен рекомбинантный штамм-продуцент гидролазы E.coli ArcticExpress(DE3)/рАррА. Оптимизированы условия культивирования штамма, условия лизиса клеток и выделения рекомбинантной фосфогидролазы АррА. Определена биохимическая активность АррА в отношении органических соединений фосфора в зависимости рН и температуры, установлено, что оптимальным является рН=5,5 и +65{o}C. Константа Михаэлиса составила 2,909. Активность АррА составляет 2608-8916 мкмоль РО[4]*мл{-1}*мин{-1}. Наработана опытная партия ферментного препарата в количестве 230 мг. Подготовлен лабораторный регламент получения рекомбинантной гидролазы АррА.*