Разработка биотехнологии создания съедобных вакцин против вирусных болезней овец
Full Name of the work head: Жамбакин К.Ж.
Исполнители проекта: Шамекова М.Х.*
: Институт биологии и биотехнологии растений
Inventory number: 0214РК00904
Registration number: 0112РК00864
Keywords: вирус оспы овец*гены*экспрессирующий вектор*генетическая трансформация*рекомбинантная вакцина*вакцина*
Выделена ДНК из очищенного препарата вируса оспы овец. Методом ПЦР амплифицирован ген А27L, который локализуется в липопротеидной оболочке внутриклеточного зрелого вириона (IMV) и фрагмент геномной ДНК гена L1R, кодирующей гидрофильный N-концевой сегмент белка внешней мембраны внутриклеточного зрелого вириона. Полученные ампликоны генов А27L и L1R были клонированы в бактериальные вектора и получена их экспрессия. Проведено переклонирование конструкций генов А27L и L1R в бинарные агробактериальные вектора для экспрессии в растениях. Проведена генетическая трансформация тканей растений табака и рапса генами А27L и L1R, получена регенерация invitro из трансформированных тканей растений на селективных средах. Полученные на селективных средах регенеранты рапса были проверены на вставку трансгена, клонированы invitro, пересажены в грунт в контролируемые условия, адаптированы и выращены в грунте. Проведена детекция белковых продуктов А27L, L1R в регенерантах полученных из трансформированных тканей растений табака и рапсаи отобранытрансгенные линии рапса по содержанию белковых продуктов А27L, L1R. Получены трансгенные растения рапса и табака экспрессирующие белковые продукты А27L и L1R, которые являются антигенами вируса оспы овец. Разработан биотехнологический регламент получения растений экспрессирующих гены белков оболочки вирусов оспы овец в качестве рекомбинантных вакцин против этих вирусов.*