Лимбальные стволовые клетки в альгинатном геле для применения в клеточной терапии
Full Name of the work head: Сансызбай А.Р.
Исполнители проекта: Наханов А.К.*
: Научно-исследовательский институт проблем биологической безопасности
Inventory number: 0214РК02076
Registration number: 0112РК00302
Keywords: Лимбальные стволовые клетки*роговица*альгинат*адгезия*диспаза*биополимер*полиуроновая кислота*трансплантация*неоваскуляризация*
Выделены лимбальные стволовые клетки (ЛСК) из роговицы глаз кроликов, мышей и свиней. Определено, что наиболее оптимальным методом получения ЛСК является их комбинированная обработка диспазой II типа и трипсином. Подобрана оптимальная питательная среда для культивирования ЛСК. Установлено, что пролиферативные свойства ЛСК преобладают в питательной среде DMEM/F12 по сравнению со средами RPMI-1640 и DMEM. Показано, что для культивирования и сохранения дифференцировочного потенциала ЛСК необходимо добавление в ростовую среду эпидермального фактора роста, фетальной бычьей сыворотки, диметилсульфоксида, трансферина, селена, гидрокортизона. При исследовании адгезивных свойств альгинатных пленок (АП) было установлено, что все испытуемые группы АП имеют низкие показатели прикрепляемости для клеток. Для улучшения адгезии клеток использован пептид-модифицированный альгинат (RGD и MVG альгинат). Оптимальной посевной дозой ЛСК на АП является концентрация клеток составляющая 2х10 кл/см. Создан трансплантационный материал из гелеобразующего раствора альгината Novatach с последующим культивированием на них выделенных из ЛСК роговицы глаз свиньи. Эффективным способом трансплантации АП на роговицу является ее зашивание хирургическим путем, так как при способе накладывания пленки на роговичный дефект АП смещалась из-за мигательных движений век и движений глазного яблока.*