Изучение факторов стресс-сигнализации, определяющих формирование радиорезистентности в лимфоцитах человека, при воздействии ионизирующего излучения in vivo и in vitro
Full Name of the work head: Джансугурова Л.Б.
Исполнители проекта: Чередниченко О.Г.*
: Институт общей генетики и цитологии
Inventory number: 0214РК01895
Registration number: 0112РК00187
Keywords: хромосомные аберрации*эффект свидетеля*внДНК*фрагменты внДНК*ионизирующая радиация*факторы стресс-сигнализации*
Проведены эксперименты показавшие, что в качестве факторов, обуславливающих эффект свидетеля могут выступать фрагменты внДНК. Это продемонстрировано введением в культуральную среду интактных лимфоцитов, внеклеточной ДНК, выделенной из образцов плазмы облученной in vitro крови. При этом в лимфоцитах-свидетелях наблюдалось развитие тех же реакций, что и в облученных клетках, т.е. увеличение частоты хромосомных аберраций. Добавление к интактным лимфоцитам внДНК, выделенной из плазмы крови людей облученных in vivo в силу своей профессиональной деятельности также увеличивает в них частоту хромосомных аберраций. Содержание внДНК в плазме крови разных доноров варьирует в широких пределах - от 100 до 2600 мкг/мл. Молекулярные массы выделенных фрагментов внДНК из плазмы облученной крови составили более 1000 п.н. Проведенная оценка уровня фрагментации ДНК лимфоцитов и его изменение на различных этапах инкубации клеток после облучения в дозах 0,05 и 2 Гр и индукции радиорезистентности, показала функционирование селективного механизма, обеспечивающего формирование радиорезистентных клеточных клонов путем элиминации клеток с поврежденным геномом. Эти лимфоциты отличаются повышенной радиочувствительностью, высоким уровнем спонтанных хромосомных аберраций и апоптоза, возрастающего после воздействия ионизирующей радиации. При протекании процессов спонтанного апоптоза или апоптоза, индуцированного радиацией в межклеточное пространство выделяются фрагменты клеточной ДНК. Однако, так как количество внДНК в культуральной среде или плазме облученной и необлученной крови принципиально не отличается, вероятно, фрагменты ДНК погибших облученных клеток, претерпевают определенную модификацию по сравнению с фрагментами ДНК гибнущих необлученных клеток, что позволяет им быть факторами стресс-сигнализации и индуцировать в интактных клетках хромосомные аберрации.*