Изучение механизмов экспрессии гена зеленого флуоресцентного белка (GFP) и организация GFP-платформы для разработки технологии получения гетерологичных белков в различных экспрессионных системах
Full Name of the work head: Момыналиев К.Т.
Исполнители проекта: Хасенов Б.Б.*
: Национальный центр биотехнологий
Inventory number: 0213РК02265
Registration number: 0112РК00354
Keywords: Зеленый флуоресцентный белок*генно-инженерные конструкции*ПЦР*гетерологичные белки*дрожжи*штаммы*биотехнология*экспрессия гена GFP*молекулярная биология*
Для разработки технологий получения гетерологичных белков различного функционального назначения в прокариотической, дрожжевой и клеточно-суспензионной системах изучен механизм экспрессии зеленого флуоресцентного белка (GFP) в прокариотических и эукариотических клетках. В результате исследования получены генно-инженерные конструкции в которых ген зеленого флуоресцентного белка (GFP) встроен под контроль алкагольоксидазного и LAC4 промотора. Путем гидролиза данных челночных векторов рестриктазами получены соответствующие экспрессионные кассеты, которыми были трансфецированы компетентные клетки штаммов Pichia methanolica, Kluyveromyces lactis u Pichia pastoris. Получены соответствующие рекомбинантные штаммы, которые были индуцированы метанолом и галактозой и в которых получена экспрессия гена gfp. Проведена иммунизация мышей и кролика рекомбинантным белком GFP. Получены и очищены поликлональные антитела против белка GFP. Область применения - молекулярная биология, биотехнология.*
