Разработка технологии транзиентной продукции целевых белков в растениях
Full Name of the work head: Момыналиев К.Т.
Исполнители проекта: Манабаева Ш.А.*
: Национальный центр биотехнологий
Inventory number: 0213РК02252
Registration number: 0112РК00351
Keywords: вирусный вектор*вирус кустистой карликовости томатов*зеленый флуоресцентный белок*транзиентная экспрессия*рекомбинантный белок*
При разработке технологии ускоренной поодукции целевых белков в растениях с помощью временной (транзиентной) экспрессии с вирусного вектора исследован вирус кустистой карликовости томатов (ВККТ). В результате разработана система транзиентной экспрессии гена GFP в растениях in planta за счет рекомбинантной конструкции Ti-BKKT-GFP, созданной на основе генома ВККТ, с помощью инфицирования растения методом агроинфильтрации. Определен наилучший продуцент репортерного зеленого флуоресцирующего белка и оптимальный возраст растений для накопления рекомбинантного белка. Получен ген рчГ-КСФ кодон, оптимизированный для экспрессии белка в клетках растений N.benthamiana длиной 574 пар нуклеотидов. Полученный ген рчГ-КСФ клонирован в вирусный вектор Т-ВККТ-ГКСФ, под контролем сильного конститутивного промотора 35S вируса мозаики цветной капусты (CaMV), обеспечивающий экспрессию ВККТ-ГКСФ в растениях.*
