Получение рекомбинантных полимераз, востребованных в научных исследованиях и диагностической практике
Full Name of the work head: Момыналиев К.Т.
Исполнители проекта: Хасенов Б.Б.*
: Национальный центр биотехнологий
Inventory number: 0213РК02240
Registration number: 0112РК00369
Keywords: полимеразы рекомбинантные*ферменты*ДНК*генетика*ПЦР*штамм-продуцент*
Разработана технология производства рекомбинантных ферментов для использования в научных исследованиях и диагностической практике. Получена генетическая конструкция pPFh, содержащая ген ДНК-полимеразы из Pyrococcus furiosus под индуцируемым бактериальным промотором РНК-полимеразы бактериофага Т7. Трансформацией плазмидным вектором компетентных клеток Escherichia coli получен рекомбинантный штамм: ArcticExpress(DE3)RP/pPFh, являющийся продуцентом Pfu-полимеразы. Подобраны оптимальные условия для наработки и выделения рекомбинантной Pfu-полимеразы. Ферментативные свойства рекомбинантного белка были подтверждены полимеразной цепной реакцией. Результаты могут быть применены в молекулярной биологии, биотехнологии.*
