Изучение иммуногенности вирусоподобных частиц, несущих эпитопы иммуноглобулина Е человека
Full Name of the work head: Момыналиев К.Т.
Исполнители проекта: Шустов А.В.*
: Национальный центр биотехнологий
Inventory number: 0213РК02217
Registration number: 0112РК00352
Keywords: астма*антитела*генноинженерия*иммуноглобулин Е*рекомбинантные белки*антигены*вирусоподобные частицы*иммуноферментный анализ*
Рассмотрена работа по получению рекомбинантных белков: белка-носителя, образующего вирусоподобные частицы (HBcAg), и рекомбинантного антигена в форме вирусоподобных частиц, представляющих на поверхности пептид. В результате исследования были получены рекомбинантный HBcAg и рекомбинантные белки E10(Ep+Cys), Ell(Ер) и E12(Ep+TrpZip). Белки E10(Ep+Cys), Ell(Ер) и E12(Ep+TrpZip) содержат вставку Ер и различаются последовательностями линкеров, фланкирующих Ер. Разработан протокол выделения и очистки рекомбинантных антигенов с использованием металлоаффинной хроматографии, гель-фильтрации, ультрацентрифугирования в градиенте плотности сахарозы и осаждением вирусоподобных частиц полиэтиленгликолем. Полученными антигенами иммунизировали мышей. Наличие в иммунных сыворотках антител, реагирующих с иммуноглобулином Е человека, подтверждено в иммуноферментном анализе с использованием в качестве иммобилизованного антигена очищенного IgE человека.*