Разработка иммунохроматографической тест-системы для диагностики бруцеллеза человека
Full Name of the work head: Момыналиев К.Т.
Исполнители проекта: Ескендирова С.З.*
: Национальный центр биотехнологий
Inventory number: 0213РК02214
Registration number: 0112РК00365
Keywords: иммунохроматография*бруцеллез человека*моноклональные антитела*коллоидное золото*рекомбинантный белок*тест-система*
Проведены исследования по получению моноклональных антител к рекомбинантному белку Cu/Zn-SOD возбудителя бруцеллеза человека и получению конъюгатов моноклональных антител (МКА) с коллоидными наноразмерными маркерами. Проведены экспериментальные исследования по получению штаммов - гибридных клеток, продуцирующие моноклональные антитела к рекомбинантному белку Cu/Zn-SOD. В результате исследований установлено, что наибольший выход рекомбинантного белка Cu/Zn-SOD был получен при 0,2 мМ IPTG и инкубации культуры с индуктором в течение 6 часов. Экспериментально обнаружено, что в данных условиях происходит усиленный синтез белка с молекулярной массой 20,8 кДа. Продуктивность наиболее активных и стабильных линий гибридом 2F5, 2Н8, ЗВ7 в условиях in vitro определялась в течение 8 дней по накоплению антител в культуральной жидкости (супернатанте клеток) и составила от 25 мкг/мл (1 сутки) до 125-250 мкг/мл (7-8 сутки культивирования), что свидетельствует об устойчивом синтезе МКА клетками испытуемых гибридом in vitro. Получен золь коллоидного золота, средний диаметр частиц которого составил 30 - 5 нм и оптимален для сорбции белка и последующей миграции полученного комплекса через поры мембран иммунохроматографической тест-полоски.*