Поучение трансгенной сои, устойчивой к абиотическим факторам
Руководитель проекта: Кершанская О.И.
Исполнители проекта: Дидоренко С.В.
Организация: Институт биологии и биотехнологии растений
Инвентарный номер: 0211РК01303
Регистрационный номер: 0109РК00317
Ключевые слова: Метод генетической трансформации, Молекулярная детекция, Продуктивность, Трансгенные растения, Сои,
Разработан способ агробактериальной генетической трансформации сои путем агробактериального пипетирования цветков после оплодотворения с использованием естественных пыльцевых трубок, отличающийся трансфером целевых генов в яйцеклетку с Agrobacterium t. через прорастающие пыльцевые трубки сразу же после опыления и интеграцией ДНК в фертильные, но еще не делящиеся клетки зиготы. Получено 1101 предположительно трансгенных семян нулевого поколения T, с геном PPDK и 1536 прредположительно трансгенных семян с геном desA12licBM3, что составило 32,1% и 37,1% от числа пипетированных цветков соответственно. Разработаны праймеры, программа ПЦР для целевых генов и их структурных элементов. Результаты ПЦР анализа трансгенных растений сои первого поколения T1 подтвердили наличие бендов, соответствующих молекулярной массе 645 нп у 19 трансгенных растений из 87, и 692 нп у 29 трансгенных растений из 169 и эффективностью трансформации 21,8% и 17,2% соответственно, или 1,73% и 1,89% от числа изначально скринированных семян. Доказано наличие вставки интродуцированных генов в геном сои во втором поколении T2 с эффективностью трансформации в среднем 2,96%. Отмечена тенденция к увеличению активности фермента СОД на 40-200% в листьях трансгенов в сравнении с контролем в условиях холодового стресса. Разработан биотехнологический регламент и технологическая схема производства получения трансгенной сои, устойчивой к абиотическим факторам.