Новая технология получения генетически индуцированных плюрипотентных эмбриональных стволовых клеток человека
Full Name of the work head: К.Н.Мукантаев
Исполнители проекта: В.Б.Огай
: Нац. центр биотехнол. РК
Inventory number: 0210РК00064
Registration number: 0109РК00563
Keywords: Фибробласты, Плюрипотентные стволовые клетки, Стволовые клетки, Культуры клеток,
Получены 3 линии первичных культур клеток эмбриональных фибробластов с нормальным кариотипом (46ХУ и 46ХХ). Освоен метод культивирования эмбриональных стволовых клеток человека. Выделена суммарная РНК. Синтезированы кДНК генов Oct4, Nanog, Sox2 и Lin28 человека. Созданы генно-инженерные конструкции, пригодные для трансфекции первичных культур фибробластов человека. Оценена эффективность трансфекции и экспрессии рекомбинантных генов Oct4 и Nanog в фибробластах. Установлено, что протестированные конструкции экспрессируются в фибробластах в течение всего периода анализа при эффективности трансфекции 10-15 %. Вектора на основе плазмиды pTandem-1 показывают достоверно более высокий уровень экспрессии генов Oct4 и Nanog по сравнению с плазмидой pBudCE4.1.
