Проведены работы по заготовке, обработке растений L. gmelinii (кермек гмелина) и L. myrianthum и идентификации надземной части растений двух промышленно значимых видов L. gmelinii и L. myrianthum. Исследованы окисленные формы флавоноидов (агликоны, гликозиды) в субстанциях, проведена качественная и количественная оценка их компонентного состава и выделение агликонов и гликозидов флавоноидов в индивидуальном виде. Подготовлен комплект документов в НЦЭЛС МЗ РК на экспертизу качества и объема доклинических испытаний с учетом требований надлежащей практики. Впервые надземная часть растений вида L. gmelinii стала фармакопейным сырьем, что увеличит сырьевую базу данного лекарственного сырья и сделает возможным создание безотходного производства.*

Изучен мировой генофонд (около 1300 образцов), и на его основе подобраны родительские формы различного эколого-географического происхождения из 21 страны мира, проведены 204 гибридных комбинации. После определения общей комбинационной способности выделено 48 гибридов второго - третьего поколения. Получена высокая степень положительной трансгрессивной изменчивости по зерновой продуктивности главного колоса (от 6,9 до 105,5 %), по числу зерен в колосе (от 5,9 до 45,8 %), что указывает на возможность улучшения этого признака методом отбора выделившихся форм. Выявлены особенности наследования основных количественных признаков у гибридов разных поколений. Характер наследования признаков гибридами второго - третьего поколения включает в разной степени все типы наследования от сверхдоминирования до депрессии. Получен разный вклад факторов "генотип", "годы", "генотип х годы" в общую изменчивость по основным элементам структуры урожая. Наибольшее влияние на наследование признаков "масса зерна главного колоса" и "число зерен" оказали погодные условия, на наследование признака "длина колоса" и "масса 1000 зерен" оказал генотип изучаемых гибридов, влияние фактора "генотип х годы" составило от 5 до 18 %. Сравнительная характеристика по степени изменчивости длины колоса, массы 1000 зерен у гибридов второго - третьего поколений показала низкий коэффициент вариации (11,2 % и 10,8 % соответственно), что свидетельствует о генетической однородности гибридного материала по этим признакам. Составлены генетические формулы ряда родительских форм и гибридов, представляющих селекционную ценность.*

Отработаны методы выделения и очистки диоксинов из кормов и животноводческой продукции. Синтезирован стандартный образец 2,3,7,8-тетрахлордибензо-пара-диоксина. Получены и культивированы люминесцентные бактерии Photobacterium phosphoreum на различных питательных средах, подобрана оптимальная среда, отработаны условия проведения биолюминесцентного анализа. Построены калибровочные кривые люминесценции со стандартным образцом диоксина, отработаны качественный и количественный варианты биотеста. Проведен мониторинг кормов, мяса, молока, масла на содержание диоксинов для определения безопасности сырья растительного и животного происхождения. Разработан биотест для определения диоксинов в кормах, кормовых добавках и в продукции животного происхождения.*

Оценены морфо-культуральные свойства отобранных штаммов при культивировании на агаризованных средах. При поверхностном культивировании исследуемых штаммов B. bassiana на агаризованных питательных средах было выявлено 5 типов колоний: мучнисто-пылевидные, войлочные нерельефные, войлочно-мучнистые рельефные, войлочные рельефные и ватообразные. Определена динамика радиального роста колонии штаммов гриба B.bassiana при разной температуре воздуха. При культивировании на среде Сабуро для всех изолятов максимальный прирост колоний наблюдался при температурах +20{o}С, +25{o}С. С точки зрения наработки конидий наиболее продуктивным штаммом является BCi[7]-12. Проведен сбор личинок и имаго колорадского жука первого и второго поколения в местах их массового размножения для определения возрастной (личиночные возраста) и фазовой (личинки и имаго) чувствительности вредителя к отобранным штаммам энтомопатогенных грибов. Наибольшую вирулентность на личинках, как младших, так и старших возрастов колорадского жука первого и второго поколения проявили только два штамма: ВCi[6]-12 и BCi[7]-12. Личинки младших возрастов оказались более чувствительным к отобранным штаммам. Для определения специфичности отобранных штаммов проводились испытания на гусеницах крапивницы, пяденицы, яблонной моли, листовертки, американской белой бабочки, а также на личинках саранчовых. В результате испытаний против чешуекрылых и прямокрылых вредителей сельского хозяйства все протестированные штаммы оказались средне и слабовирулентными. Отобранные штаммы специфичны только для колорадского жука.*

В урочище реки Чапайка в мае-июне 2012 г. было найдено 32 образца погибших насекомых с признаками микоза. Из собранных образцов изолировано в чистую культуру 30 изолятов энтомопатогенных грибов. По результатам идентификации отмечено, большинство принадлежит к виду Beauveria bassiana s.l., семейству Clavicipitaceae, отделу Ascomycota; 1 штамм - к роду Isaria. В 2012 году в лабораторных условиях была оценена биологическая активность 23 штаммов гриба Beauveria bassiana и одного Isaria farinosa на личинках младших возрастов мароккской саранчи Dociostaurus maroccanus. Все испытуемые культуры грибов имели высокую вирулентность в отношении личинок вредителя. На личинках итальянского пруса Calliptamus italicus оценена вирулентность 37 штаммов 34 штаммов гриба B. bassiana и 3 - I. farinosa. Анализ полученных данных показал, что все испытуемые культуры грибов, проявили высокую биологическую активность. В отношении чернополосой кобылки Oedaleus decorus все испытуемые культуры грибов также показали высокую биологическую активность (100 %-й уровень смертности на 13-е сутки). По скорости гибели личинок вредителя наиболее перспективными являются культуры BLe-06, BLe-07, BCu[17]-07, BCu[22]-07 и ЮК[4]-09. При заражении микроспоридиями уровень смертности личинок вредителя был существенно ниже по сравнению с другими вариантами опыта, но выше относительно контроля. На основе штамма ВАР[3]-10 на твердом субстрате (пшене) нарабатывалась полупрепаративная форма микоинсектицида в виде сухого порошка. Изучение структуры видового состава микромицетов после интродукции обоих штаммов показало, что через сутки в почвенной микобиоте доля B. bassiana s.l. варьировала в пределах от 72 до 97 %.*

В результате обследований биоценозов Джунгарского Алатау в 2012 году было собрано 80 трупов насекомых с признаками микоза, из них изолировано в чистую культуру всего 41 образец. По результатам идентификации, 38 изолятов принадлежат к виду Beauveria bassiana и 3 изолята - к роду Isaria. Выявлена высокая вариабельность штаммов энтомопатогенных грибов из анаморфных родов по признаку вирулентности на обыкновенном паутинном клеще. Высокую вирулентность показали 36,8 % из всех испытанных культур. В качестве наиболее перспективных с точки зрения контроля численности обыкновенного паутинного клеща были отобраны штаммы BCi[3]-12, BAP[2]-12 и BCoc[2]-12. Испытуемые культуры грибов показали высокую биологичесую активность на личинках оранжерейной белокрылки и персиковой тли. В условиях теплиц был отобран штамм ВСос[2]-12. Оценка биологической активности наработанных ППФ на основе штамма ВСос[2]-12 и ББК-1 в лабораторных условиях и в условиях теплиц была проведена в отношении тепличной белокрылки, бахчевой тли и обыкновенного паутинного клеща в тепличном хозяйстве Кызылординской обл. Штамм ВСос[2]-12, способен эффективно сдерживать численность тепличной белокрылки в течение недели на уровне более 75 % и двух недель - не ниже 55 %. При испытании против обыкновенного паутинного клеща (Tetranychus urticae Koch.) на растениях огурца уровень снижения численности вредителя составил на 7-е сутки 56,6-59,7 %. Таким образом, при повышенных нормах расхода отобранный штамм проявляет относительно высокую и акарицидную активность в условиях производственных теплиц.*

Выделено 96 изолятов бруцелл, циркулирующих на территории Республики Казахстан. Проведено накопление бактериальной массы и выделение ДНК из 100 штаммов и 96 изолятов бруцелл. Проведена генетическая идентификация штаммов и изолятов бруцелл. Методом анализа нуклеотидной последовательности 16S rRNA гена установлена контаминация 3-х изолятов, остальные 193 образца ДНК были идентифицированы как Brucella spp. Видовая идентификация мультиплексным ПЦР позволила идентифицировать 93 изолята как B. melitensis, 95 штаммов как B. abortus и 5 штаммов предварительно как B. suis. Пополнена коллекция образцами ДНК: 93 B. melitensis, 95 - B. abortus и 5 - B. suis. Протокол MLVA типирования апробирован на 10 образцах ДНК выделенных от изолятов, в результате чего был получен MLVA профиль 16 тандемных повторов. Доказана достоверность MLVA типирования маркера Bruce 09 методом прямого секвенирования. Собрана коллекция образцов ДНК бруцелл, получен MLVA профиль 10 изолятов бруцелл.*

Разработан метод молекулярно-генетической паспортизации сортов, гибридов и линий мягкой пшеницы с целью повышения качества селекции. Проведен поиск нуклеотидных последовательностей LTR областей ретротранспозонов генома пшеницы с использованием специализированных электронных баз данных TREP, Repbase и NCBI. Проведенный анализ ДНК растений-регенерантов с праймерами к ретротранспозонам выявил высокую степень полиморфизма по продуктам амплификации. Индексы полиморфизма при использовании праймеров варьировали от 0,127 до 0,875, наибольшая разрешающая способность выявлена у праймера 2109 Daniela - 10,28. Разработана принципиально новая технология молекулярно-генетической паспортизации по результатам фрагментного анализа рестрицированных IRAP-амплификатов. Данный метод является высокоинформативным для идентификации и паспортизации мягкой пшеницы.*

Проведена селекционная оценка линий регенерантов в условиях степной зоны Северного Казахстана. Выделены 8 образцов пшеницы, устойчивых к засухе. В конкурсном сортоиспытании на паровом фоне достоверно превысили стандарт Астана по урожайности три линии: 26/97 с 5 % А.а. N 6-2; 275/94-3 с 2-5 % ПЭГ N 1-4; 29/97 с МС N 1-1. По результатам биохимической оценки качества зерна выделено 4 образца пшеницы. Проанализированы различные линии яровой мягкой пшеницы с использованием различных праймеров. По результатам исследований ПЦР, проведенных с различными праймерами, можно предположить, что RAPD праймеры OPК9 и OPD14 могут быть использованы для выявления генетического полиморфизма линий яровой мягкой пшеницы.*

Разработан протокол видовой дифференциации C. fetus, C. jejuni, C. сoli, аналитическая чувствительность для C. fetus 78 геномных эквивалентов, для C. 314 геномных эквивалентов и для C. jejuni 157 геномных эквивалентов. Специфичность была доказана на 40 коллекционных образцах ДНК. Разработан набор для выделения ДНК из клинического материала, обладающий высокими аналитическими характеристиками. Разработана мультиплексная ПЦР тест-система для одновременного выявления и видовой дифференциации C. coli, C. fetus и C. jejuni. Аналитическая чувствительность для C. coli и C. fetus составила 213 фг или 108 геномных копий, а для C. jejuni составила 26,7 фг или 13,7 геномных копий. Апробация на контрольных образцах ДНК подтвердила высокую специфичность тест-системы. Проведен выпуск опытной партии тест-систем и их испытание в условиях диагностических лабораторий, которые показали высокую диагностическую эффективность. Разработаны нормативно-технические документации на ПЦР тест-системы. Разработаны ПЦР тест-системы для диагностики кампилобактериоза животных. Получены полногеномные последовательности двух видов кампилобактерий: Campylobacter hyointestinalis и Campylobacter mucosalis.*