Изучены биохимические свойства изолята "Сайгачий" и штамма "Pasteurella/Saigas/2011/ZKO/KZ" возбудителя пастереллеза. Приготовлен антиген возбудителя пастереллеза, и на основе антигена получены антисыворотки на разных видах животных. Наиболее активные и специфичные сыворотки получены на овцах. Из антисывороток выделены иммуноглобулины по методу Кона и с применением сернокислого аммония. На основе приготовленных иммуноглобулинов получены специфические иммунопероксидазные конъюгаты по методу Уилсон и Накане. С использованием полученных диагностических препаратов оптимизирована постановка иммуноферментного анализа.*

Разработан режим орошения риса на оросительных системах, обеспечивающий благоприятный водный, солевой и тепловой режимы на орошаемых землях. Температурный режим воды в чеке непосредственно связан с глубиной воды. При глубине 12-15 см за термически активную фазу дня температура воды в чеке прогревается до 32,3{o}С. По мере наращивания слоя воды температурный режим начинает сглаживаться. Увеличение глубины воды до 17-22 см приводит к уменьшению температуры на 2,5-3,8{o}С. Благоприятный солевой режим почв под рисом имеет место при слое затопления 17-22 см. В период после кущения до начала восковой спелости риса наиболее оптимальным с точки зрения обеспечения благоприятного солевого режима почв является слой затопления глубиной 17-22 см. Установлено, что при глубине затопления рисовых чеков 12-15 см, когда неровность поверхности равна (+,-) 7 см и более, на половине площади чека глубина слоя воды составляет 10-11 см и менее. Это ухудшает солевой и температурный режимы. В результате заметно уменьшается урожайность риса. В нынешних условиях в регионе площадь посевов риса с неблагоприятным режимом затопления составляет примерно 29,0 тыс. гектаров. При поддержании в чеке слоя воды 17-22 см площади посевов риса с неблагоприятным режимом затопления в целом по региону уменьшаются в 2 раза. Поэтому внедрение рекомендуемого режима орошения риса в период после кущения позволяет увеличить урожайность культуры по региону на площади около 14-15 тыс. гектаров на 5-7 центнеров с гектара.*

Синтезированы гены полиэпитопных антигенов ящура серотипов O, A, Asia-1, получены плазмиды для бактериальной экспрессии pET22/HBcAg_EVRO (серотип O), pET22/HbcAg_EVRA (серотип A), и pET22/HbcAg_Asia1 (серотип Asia-1). Наработаны полиэпитопные антигены (ПА) ящура серотипов O, A, и Asia-1, иммунизированы лабораторные животные и исследована серореактивность полученных иммунных сывороток против антигенов VP1 ящура гомологичных серотипов. Созданные ПА ящура в форме вирусоподобных частиц обладают патентной новизной. Отличием созданных в данном проекте антигенов от субъединичных рекомбинантных белков, описанных в научной литературе в качестве антигенов ящурной вакцины, является то, что созданные ПА образуются в форме высокоиммуногенных вирусоподобных частиц. Значимость выполненной работы заключается в создании антигенов для рекомбинантной ящурной вакцины, которая, несмотря на интенсивные исследования в мире, пока еще не достигла стадии практического применения ни в одной стране мира. Рекомбинантная ящурная вакцина является объектом интенсивных исследований по причине безопасности, высокой экономической эффективности и совместимости с диагностическими DIVA-тестами.*

Получен рекомбинантный gp51 антиген вируса лейкоза. Получены штаммы гибридных клеток, продуцирующих моноклональные антитела к gp51 антигену вируса бычьего лейкоза крупного рогатого скота, и препараты очищенных моноклональных антител. Разработан непрямой вариант иммуноферментного анализа для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота, обладающий высокими показателями специфичности и чувствительности.*

Изучены особенности морфогенеза трансформированных семядольных, гипокотильных и корневых эксплантов хлопчатника в культуре in vitro на среде, содержащей селективный агент РРТ. Установлен негативный эффект высокой концентрации селективного агента, который угнетал пролиферацию клеток в культуре in vitro. Определены параметры селекции трансформированных клеток, тканей растений-регенерантов хлопчатника в культуре in vitro с использованием РРТ. В результате ступенчатой селекции были получены фосфинитрицин устойчивые растения из апикальных меристем и пазушных почек хлопчатника сорта Туркистан. Данный способ обеспечивает высокую степень повторяемости и надежности, а также дает возможность осуществлять генетическую трансформацию растений хлопчатника. Проведен мониторинг фосфинотрицин устойчивых 14 растений хлопчатника сорта Туркистан на наличие и экспрессии целевых генов с помощью ПЦР, подтвержден трансгенный статус и экспрессия гетерологичного гена в 11 из них. Проведена Agrobacterium - опосредованная трансформация хлопчатника сорта Туркистан с геном РАТ, который кодирует фосфинотрицин - ацетилтрансферазу. Создание генетически модифицированных растений казахстанских сортов хлопчатника, обладающих устойчивостью к гербицидам на основе фосфинотрицина (глюфосината), позволит отказаться от использования экологически небезопасных гербицидов, которые обладают высокой токсичностью для окружающей среды, уменьшить время и частоту обработки полей и, тем самым, снизить экологическую нагрузку на окружающую среду.*

Проведены экспериментальные исследования макетных образцов интегрированного устройства емкостного водонагревателя, охладителя молока, грунтового теплообменника, теплового насоса, микропроцессорного управления, обоснованы их основные параметры. Разработаны и утверждены технические задания на изготовление экспериментальных образцов. Предлагаемое интегрированное устройство отличается от известных. В соответствии с запросами сельскохозяйственного производства в него дополнительно введены функции: охлаждения и хранения скоропортящейся продукции, обеспечения регулируемого микроклимата животноводческого помещения с одновременной утилизацией избыточного тепла за счет использования теплового насоса. В сочетании с солнечными коллекторами, грунтовым теплообменником достигается надежность системы при снижении эксплуатационных затрат. Новизна технического решения подтверждена инновационным патентом РК.*

Иммунохроматографическая тест-система создана на основе принципов "сухой химии": все необходимые для исследования иммунореагенты нанесены и высушены на стрипах (иммунохроматографические тест-полоски) в условиях лабораторного производства. Оптимизация состава и соотношения экстрагирующего буфера обеспечила аналогичность скорости движения фронта жидкости как в буферном растворе, так и в модельной системе (неосветленный экстракт здоровых растений) при минимальной концентрации очищенных препаратов PVХ и PVY- 0,01 мкг/мл. Достигнуто полное совпадение результатов определения вирусной инфекции на образцах листьев пробирочных растений, гибридов и регенерантов из теплицы и линии сортов картофеля из полевого питомника методом иммунохроматографического анализа с данными иммуноферментного тестирования коммерческим набором. Разработанная иммунохроматографическая тест-система на основе моноклональных антител позволяет достоверно определять PVХ и PVY-вирусы в экстрактах из листьев картофеля за 10 мин и может быть использована для внелабораторных и полевых условий. Разработан и утвержден лабораторный регламент иммунохроматографической тест-системы. Впервые в РК предложена иммунохроматографическая тест-система для экспресс-диагностики вирусных инфекций картофеля.*

Создана эффективная универсальная технология для генетической паспортизации коллекции сортов картофеля на основе анализа полиморфизма микросателлитов. Подобран набор 8 SSR-маркеров, отличающихся единичной локализацией в разных группах сцепления, позволяющий проводить идентификацию сортов картофеля. Для каждого сортообразца получены индивидуальные SSR-спектры, которые использованы при паспортизации сортов. Молекулярно-генетические паспорта на основе 12 микросателлитных маркеров 30 сортов и селекционных клонов казахстанской селекции картофеля внедрены в селекционный процесс. Составлены методические рекомендации "Эффективная универсальная технология для генетической паспортизации коллекции картофеля".*

Разработан способ мультиплексной дифференциации 8 видов бруцелл и 3 вакцинных штаммов, согласно рекомендациям МЭБ. Проведена его апробация на коллекционных образцах ДНК. Разработан набор для выделения ДНК из клинического материала. Сравнительный анализ с аналогами коммерческих производителей и стандартных методов выделения ДНК доказала высокую аналитическую характеристику набора. Новизна результатов заключается в том, что впервые разработана отечественная ПЦР тест-система для видовой идентификации бруцелл. Произведен выпуск опытной партии тест-систем с их испытанием в диагностических лабораториях. Испытания показали высокую специфичность, чувствительность и перспективность внедрения разработанных тест-систем в диагностические лаборатории. На основании полученных результатов разработана нормативно-техническая документация.*

Созданы молекулярно-генетические тесты, основанные на полиморфизме ДНК. Для идентификации родственных отношений между поголовьем в племенных хозяйствах разработан протокол и тест-системы для 12 микросателлитных локусов, основанные на использовании вариабельности коротких тандемных повторов между индивидами. В каждой паре фланкирующих праймеров один праймер связан с флуоресцентными метками такими, как TAMRA, R110, R6G и ROX. Впервые для идентификации носительства маркеров, коррелирующих с хозяйственно-ценными признаками были разработаны наборы, основанные на использовании однонуклеотидных полиморфизмов в генах, ответственных за гомеостаз организма, а также за контроль и регуляцию клеточных циклов в период онтогенеза. Для созданных ПЦР тест-систем к маркерным мутациям rs42940187, GRB10_p (A5394141C), rs43375833, rs42575466, rs42575474 подтверждено распределение частот встречаемости аллельных вариантов в доверительном интервале от 0.0001 до 0.095. Тем самым, наборы к мутациям rs42940187, GRB10_p (A5394141C), rs43375833, rs42575466, rs42575474 могут быть использованы для оценки племенного статуса и продуктивности животных. Созданные ПЦР тест-системы будут рекомендованы для внедрения в процесс селективной работы племенных станций Республики Казахстан. Наборы получили регистрационное удостоверение в международной организации по интеллектуальной собственности научных разработок.*